Billedkilde: ARIMAG /.com
Husk sidste gang, hvor dine rør viste kondensdråber efter temperaturinkubation i en termoblok eller termomikser? Til sidst havde du endda et præstationstab i din ensymatiske reaktion.
hvad er kondens?
kondensation defineres som ændringen fra gasfasen til væskefasen. Kondensation er den omvendte fordampningsproces. Kondensationsprocessen opstår, når dampen er mættet og kommer i kontakt med en kold (eller koldere) overflade sammenlignet med dens oprindelse.
jo højere temperaturdeltaet mellem det varmeste og det koldeste sted i et lukket system, jo hurtigere får du kondens. Microtube er et perfekt lukket system.
mange reaktioner har brug for specifikke temperaturer over stuetemperaturer som 37 liter C, 42 liter C, 95 liter C osv. Som et resultat vil et inkubationstrin på 30 min ved f.eks. 65 liter C ende med et lag kondensatdråber inden i låget på dit rør. Du tror måske, et spin i centrifugen og 100% af prøven er tilbage i bunden af mikrotuben. Denne proces hjælper faktisk med at bringe kondensdråberne tilbage til din prøve.
men der kan stadig være et problem med den udførte reaktion, som udføres, når du starter dit centrifugeringstrin. Reagenser har brug for konstante betingelser for molekylære processer som ligering, amplifikation, translation, begrænsning eller hvilken som helst reaktion der skal udføres.
reaktiviteten afhænger af temperaturen, tilgængeligheden af reaktionspartnere, men også af saltkoncentrationen i prøven. Under forudsætning af en 25-analyse, som har en saltkoncentration på f.eks. 5%. Da kondensationsprocessen er begrænset til væsker, øger det beregnede 3 liter kondensat i låget saltkoncentrationen i den resterende prøve i bunden af røret med næsten 14 %.
(tommelfingerregel: 5 % af 25 liter reaktionsvolumen: 1,25 liter salt, 22 liter væske inkl. saltet forbliver efter kondensering, dette er nu 5.682 % af det samlede volumen; hvilket resulterer i 13.6% højere saltkoncentration)
denne øgede saltkoncentration vil sandsynligvis ikke stoppe din reaktion, men kan påvirke effektiviteten af det, hvilket resulterer i et andet udbytte end muligt under optimerede forhold. Bundlinjen er, at du mangler konstante / reproducerbare og effektive forhold.
der er en enkel og bekvem måde at undgå kondens på: Hold dine prøvevæsker det “koldeste sted” i reaktionsrøret. Reaktionstemperaturen er helt sikkert indstillet til f. eks. 70 liter C. Hvordan går man videre?
en løsning kan være en modopvarmning fra toppen af beholderen med et opvarmet låg.