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써모 블록 또는 써모 믹서에서 온도 배양 후 튜브에 응축 물방울이 마지막으로 나타난 시간을 기억하십니까? 최후에,너는 조차 너의 효소 반응안에 성과 손실이 있었다.
응축이란?
응축은 기체 상에서 액상으로의 변화로 정의된다. 응축은 기화의 역 과정입니다. 응축 과정은 증기가 포화되어 그 기원에 비해 차가운(또는 추운)표면과 접촉 할 때 발생합니다.
폐쇄 시스템 내에서 가장 따뜻한 곳과 가장 추운 곳 사이의 온도 델타가 높을수록 응축이 더 빨리 발생합니다. 마이크로 튜브는 완벽하게 폐쇄 된 시스템입니다.
많은 반응은 실온보다 높은 특정 온도를 필요로 한다. 그 결과,30 분(예:65 분)의 인큐베이션 단계는 튜브 뚜껑 안에 응축수 방울이 쌓입니다. 원심 분리기에서 한 번의 스핀과 샘플의 100%가 다시 마이크로 튜브의 바닥에 있다고 생각할 수 있습니다. 이 과정은 실제로 당신의 견본에 응축 작은 물방울을 되살리는 것을 돕습니다.
그러나 원심 분리 단계를 시작할 때 수행되는 수행 된 반응에 여전히 문제가있을 수 있습니다. 시약은 결찰,증폭,번역,제한 또는 효소 반응을 수행해야하는 것과 같은 분자 과정에 일정한 조건이 필요합니다.
효소의 반응성은 온도,반응 파트너의 가용성뿐만 아니라 샘플 내의 염 농도에 따라 달라집니다. 예를 들어 5%의 염 농도를 갖는 25 개의 효소 분석법을 가정한다. 응축 과정이 액체로 제한되기 때문에,뚜껑 내의 계산 된 3,000 리터 응축수는 효소 반응 단계 동안 튜브의 바닥에 남아있는 샘플 내의 염 농도를 거의 14%증가시킵니다.
(경험치:25 의 5%반응량:1.25 소금,22 액체 포함. 이 증가 된 소금 농도는 아마도 당신의 반응을 멈추지 않을 것입니다하지만 최적화 된 조건에서 가능한 다른 수율의 결과로,효소의 효율에 영향을 미칠 수 있습니다. 결론은,당신은 상수/재현 가능하고 효율적인 조건을 놓치고 있다는 것입니다.
응축을 피할 수 있는 간단하고 편리한 방법이 있습니다:샘플 액체를 반응 튜브에서”가장 추운 곳”으로 유지하십시오. 확실히,반응 온도는 예를 들어 70 으로 설정된다.
하나의 용액은 가열된 뚜껑에 의해 용기 상부로부터 역가열될 수 있다.