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あなたの管がthermoblockまたはthermomixerの温度の孵化の後で凝縮のしぶきを示した最後の時間を覚えなさいか。 最終的には、あなたもあなたの酵素反応でパフォーマンスの損失を持っていました。
結露とは？
凝縮は、気相から液相への変化として定義されます。 凝縮は気化の逆のプロセスです。 凝縮プロセスは、蒸気が飽和し、その起源と比較して寒い（または寒い）表面と接触するときに発生します。
閉じたシステム内の最も暖かい場所と最も寒い場所の間の温度デルタが高いほど、結露が速くなります。 Microtubeは完全に閉鎖したシステムである。
多くの反応は、37℃、42℃、95℃などの室温よりも高い特定の温度を必要とします。 その結果、例えば65°Cの30分の孵化のステップはあなたの管のふた内の凝縮物のしぶきの層で終わる。 遠心分離機で1回転し、サンプルの100％がマイクロチューブの底に戻っていると思うかもしれません。 このプロセスは実際にあなたのサンプルに凝縮液滴を戻すのに役立ちます。
しかし、遠心分離ステップを開始するときに行われる実行された反応にはまだ問題があるかもしれません。 試薬は、ライゲーション、増幅、翻訳、制限、または任意の酵素反応を実行する必要があるような分子プロセスのための一定の条件を必要とする。
酵素の反応性は、温度、反応相手の利用可能性だけでなく、サンプル内の塩濃度にも依存する。 例えば５％の塩濃度を有する２ ５μ Ｌの酵素アッセイを仮定する。 凝縮プロセスが液体に限られるので、ふた内の計算された3μ lの凝縮物はほぼ14%酵素の反作用のステップの間に管の底で残りのサンプル内の塩＜6359＞＜6238＞（経験則：25μ lの5％反応量：1.25μ g塩、22μ lの液体を含む。 塩は縮合後に残り、これは総体積の5.682％であり、その結果、塩濃度が13.6％高くなる）
この塩濃度の増加はおそらく反応を止めることはできませんが、酵素の効率に影響を与える可能性があり、最適化された条件下では可能な収率とは異なる収率になる可能性があります。 要点は、一定/再現可能で効率的な条件が欠落していることです。
凝縮を避ける簡単で便利な方法があります：サンプル液体を反応管の”最も寒い場所”に保ちます。 確かに、反応温度は例えば70℃に設定される。
一つの溶液は、加熱された蓋によって容器の上部から逆加熱することができる。