La escena forma parte del ciclo Historias de Jesús y, al igual que los demás, muestra más de un episodio al mismo tiempo. El friso tiene la inscripción REPLICATIO LEGIS EVANGELICAE A CHRISTO (‘Repetición de la Ley Evangélica por Cristo’). La cena se encuentra en un ábside semicircular, con una mesa en forma de herradura en cuyo centro está sentado Jesús, los apóstoles a su lado. Judas, como de costumbre, se representa a un lado, por detrás; el gato y el perro que luchan son elementos que enfatizan aún más su connotación negativa. La escena muestra el momento inmediatamente después de la anunciación de Jesús en que un apóstol lo traicionaría. Las reacciones de sus oyentes incluyen tocarse el pecho o murmurar entre ellos.
La mesa no tiene comidas, sino un solo cáliz frente a Jesús; algunos utensilios de cocina dorados o plateados se muestran en primer plano, un ejemplo de bodegón inspirado en la pintura flamenca contemporánea y extendido en el arte florentino de la época. A los lados, dos parejas de figuras visten ricas prendas. Otro perro está saltando a la izquierda.
Dentro de las tres ventanas detrás de la mesa hay tres escenas de la Pasión: la Oración en Getsemaní, el Arresto de Jesús y la Crucifixión. Estas son atribuidas por algunas autoridades a Biagio d’Antonio. Perugino usó el mismo efecto panel dentro de un panel en su última Cena.