Latz Laboratory

生物発光の最も印象的なデモンストレーションの1つも最も簡単です。 渦鞭毛藻類、海面での生物発光の最も一般的なソースは、容易に実験室で成長しています。 彼らは攪拌時に明るい生物発光を生成します。 以下の手順は、渦鞭毛藻の培養物を入手し、家庭、学校、または実験室でそれらを成長させる方法を説明しています。 その後、生物発光のデモンストレーションのWebページをチェックしてくださ とても幸運！

本藻類培養技術は、渦鞭毛藻類および他の植物プランクトンの培養に関する包括的な参考文献である。

ここでは、発光渦鞭毛藻を得るためのいくつかの場所があります。 このリストは裏書ではなく、単なる提案であることに注意してください:

• Pyrofarms(760-335-0990)
  明るい渦鞭毛藻Pyrocystis fusiformisと栄養素の培養。
• Sunnyside Sea Farms(805-964-5844)
  “Lights from The Sea”. 異なるサイズのPyrocystis fusiformisの培養物。
• EMPCO
• UTEX(University of Texas)Culture Collection of Algae
  科学者が使用する藻類培養コレクション。
  Pyrocystis noctiluca LB2504(大球状細胞、明るい発光)
  Pyrocystis lunula LB2166(急速な成長、明るい発光)
  Pyrocystis lunula LB2504(急速な成長、明るい発光)
• 国立海洋藻類-微生物叢センター
  発光渦鞭毛藻および他の植物プランクトンの大規模な培養コレクション、科学者によって使用される…..

栄養素

観葉植物を育てることができれば、渦鞭毛藻を維持することができます。 あなたの観葉植物が成長を助けるために肥料を必要とするのと同じように、渦鞭毛藻類も栄養ニーズを持っています。 渦鞭毛藻は硝酸塩、リン酸塩、微量金属、ビタミンを必要とします。 これらの栄養素は滅菌条件下で調製されるため、オートクレーブが利用できない場合は、独自のものを作るよりも既に準備されたメディアを購入する方が簡単です。

• パイロファームズとEMPCO（上記参照）は、渦鞭毛藻の成長のためにすぐに使用できる栄養素を販売しています。
• • 藻類-グロ海水培地”海洋藻類を培養するための”。
    これはすぐに使える完全な解決策です。 渦鞭毛藻を追加するだけです。
  • 藻類を培養するためのガイド。
• シグマ-アルドリッチ（株） ,www.sigmaaldrich.com
  • ギラード(f/2)ケイ酸塩を含まない海洋濃縮基礎塩混合物
    “Guillard(1975)によって記述されたマクロおよび微量栄養素を含む。”
    Sigma#G1775,価格1 14.80(USD)for10L.
    これは完全なすぐに行くソリューションです。 渦鞭毛藻を追加するだけです！
• 国立海洋藻類-微生物叢センター
  • 渦鞭毛藻類のためのL1またはf/2培地を選択してください。
  • 準備された媒体（1ガロン、使用可能な）または媒体のキット（ちょうど海水を加えなさい）
  • do-it-your-selferのため（勇敢のためだけ、殺菌のために敏感なバランス

文化を維持する

あなたが必要とするのはライトとタイマーだけです。 滅菌メディアとガラス製品を使用する場合は、あなたの文化は永遠に継続されます;毎月いくつかの新しい媒体に文化の約1/4を注ぎます。 あなたは無菌培養条件を維持することができない場合は、細菌が培養物を過増殖する前に、細胞は月にわずか数週間続くことができます。

• 室温（20-25℃）
• 冷白色蛍光灯またはLED電球による照明。 ショップライトはうまく動作します。
• ライトサイクル（各ライト、ダーク12時間）。 暗い周期に少なくとも2時間生物発光を示して下さい。
• 培養フラスコ—滅菌ガラス製品オートクレーブが利用可能な場合は、それ以外の場合は使い捨ての組織培養フラスコ
• 培養培地（上記参照）を使用してくださ)

細胞濃度の測定

観察または測定される生物発光の量は、存在する細胞の数に依存する。 細胞濃度を決定する最も簡単な方法は、ステレオ顕微鏡を使用して細胞のサブサンプルを数えることです。 Pyrocystis fusiformisを数えるプロトコルは次のとおりです:

• ゆっくりと内容物を徹底的に混合するためにフラスコを数回旋回させます。
• 既知の体積を測定できるp1000pipetmanまたは同等のピペットを使用して200μ lのサンプルを除去します。
• サンプルを井戸スライドに入れます。
• 実体顕微鏡下での細胞数を数える。
• ボリュームに10-20個のセルがあるように音量を調整します（つまり、数えやすいです）。
• 5-6個のサンプルを採取し、それぞれを窪みスライドの井戸に入れる。
• 実体顕微鏡下で細胞数を数える。 平均セル数を計算します。
• 計算#細胞/mL(平均#細胞/使用量*1000μ l/mL)
• 例えば、20細胞/200μ l*1000μ l/mL=100細胞/mL